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嚙齒類(lèi)動(dòng)物血常規結果分析注意事項
血液學(xué)檢查是動(dòng)物疾病狀態(tài)評估、術(shù)前檢查和常規體檢中必不可少的內容。評估血常規檢測報告的可靠性并解讀其結果是獸醫朋友們的工作日常。本文就血液學(xué)檢查的一些要點(diǎn)進(jìn)行分析探討。
采血是進(jìn)行血常規檢查的第一步,本公眾號曾經(jīng)發(fā)表《獸醫隨筆:實(shí)驗動(dòng)物采血指南》一文,介紹采血量和采血點(diǎn)的一般指導意見(jiàn)。
進(jìn)行血液學(xué)分析時(shí)通常建議用EDTA抗凝管采集樣本,但采集時(shí)應該注意抗凝劑和血液的比例。樣本質(zhì)量會(huì )顯著(zhù)影響檢測結果,常見(jiàn)的樣本質(zhì)量問(wèn)題有:
抗凝效果不佳導致出現血凝塊,會(huì )使血小板(PLT),白細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細胞壓積(HCT)假性降低;
溶血會(huì )使RBC、HCT假性降低的同時(shí)平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性升高;
乳糜血會(huì )使血紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;
樣本不新鮮會(huì )使紅細胞形態(tài)發(fā)生改變導致MCV和HCT假性升高,MCHC假性降低,同時(shí)白細胞形態(tài)也會(huì )發(fā)生改變。
紅細胞、白細胞和血小板是血常規報告中需要解讀的三個(gè)方面。
紅細胞
相比于人及其他哺乳類(lèi)動(dòng)物,嚙齒類(lèi)動(dòng)物的紅細胞自有其特征。倉鼠的RBC約6.0微米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生時(shí)紅細胞較大(10.03 μm),但在出生后30天內變到小于6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨年齡增長(cháng)而增加。多色性是嚙齒類(lèi)動(dòng)物血象的一個(gè)常見(jiàn)特征。在豚鼠血涂片上還可見(jiàn)紅細胞疊連。特定疾病模型小鼠中,如β地中海貧血模型小鼠RBC可觀(guān)察到異常形態(tài),例如靶形紅細胞、棘形狀紅細胞、淚滴狀紅細胞、破碎狀紅細胞、有核紅細胞等。
(圖片來(lái)源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數哺乳動(dòng)物(包括人)不同的是,新生嚙齒類(lèi)動(dòng)物(小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠)的血紅蛋白和血細胞比容值低于成年動(dòng)物;新出生大鼠有16%的網(wǎng)織紅細胞,成年后則減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計數存在性別差異,雌性的計數通常比雄性高。不同品系的小鼠和大鼠,血紅蛋白值也會(huì )有很大的差異。
樣本采集部位或麻醉的影響會(huì )導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾部采集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從腹主動(dòng)脈或心臟中采集的樣本中要高。豚鼠中已經(jīng)證實(shí)RBC值可能由于麻醉期間發(fā)生脾內紅細胞扣留而降低。
影響RBC參數的非致病性條件還包括妊娠、季節變化等。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋白濃度和紅細胞比容在冬眠期間升高,這是因為在冬眠期間,倉鼠基礎代謝率降低,RBC壽命延長(cháng)了。
紅細胞和貧血
紅細胞指標重點(diǎn)關(guān)注RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提示動(dòng)物貧血或紅細胞增多。
嚙齒類(lèi)動(dòng)物中并沒(méi)有原發(fā)性的紅細胞增多癥,但可能見(jiàn)于輕度脫水的動(dòng)物。貧血則較為常見(jiàn)。初步判斷為貧血后,還需要關(guān)注平均紅細胞體積(MCV),MCH和MCHC,可用于輔助判斷貧血類(lèi)型,這三項都偏低常見(jiàn)于缺鐵性貧血,而高于正常范圍多見(jiàn)于葉酸或維生素B12缺乏引起的貧血。網(wǎng)織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞,是反映骨髓造血功能的重要指標。當其升高時(shí),提示骨髓造血功能旺盛,可能有溶血性貧血、缺鐵性貧血等;而當其降低時(shí),可能有再生障礙性貧血、急性白血病等。
儀器分析的血常規化驗單只能給出各種細胞的數量,但并不能給出細胞形態(tài)的異常描述。因此為了更準確分析血液學(xué)檢查結果還建議對血樣涂片進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查。
RBC形態(tài)學(xué)可區分貧血的原因:出血、溶血、缺鐵、非再生性貧血、骨髓疾病或淋巴細胞增生性疾病(白血病)等。
如果診斷為溶血性貧血,則需要在血涂片中尋找血液寄生蟲(chóng)的證據,如球狀附紅細胞體和鼠血巴爾通體可能導致小鼠或大鼠貧血。如果出現小紅細胞增多癥、血色素減少、總蛋白低、血小板增多和網(wǎng)織紅細胞計數升高則提示有慢性失血,建議檢查體表寄生蟲(chóng),在虱子嚴重感染的豚鼠和大鼠中可見(jiàn)這種現象。
白細胞
白細胞是機體抵御感染、調控炎癥、免疫和造血的關(guān)鍵。
嚙齒類(lèi)動(dòng)物的白細胞形態(tài)和其他哺乳動(dòng)物相似,但又有一定區別,嚙齒類(lèi)動(dòng)物的粒細胞被稱(chēng)為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆粒,與嗜酸性粒細胞相似。豚鼠有獨特的Foa-Kurloff細胞(一種T淋巴細胞),含有一個(gè)大的細胞質(zhì)包涵體。嚙齒類(lèi)動(dòng)物的白細胞類(lèi)型與其他哺乳動(dòng)物相似,但淋巴細胞數量遠超過(guò)粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸性粒細胞約占1% ~ 4%,嗜堿性粒細胞很少。
WBC計數每天都會(huì )發(fā)生波動(dòng),因此采集樣本的位置和時(shí)間不同,結果也可能不同。中性粒細胞計數隨著(zhù)大鼠年齡的增長(cháng)而增加,淋巴細胞計數隨著(zhù)年齡的增長(cháng)而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來(lái)源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞:淋巴細胞
淋巴細胞增多
淋巴細胞分為T(mén)淋巴細胞和B淋巴細胞,大多在外周淋巴組織中生成并在血液和淋巴組織中循環(huán)。淋巴細胞的增多大多為生理性的。反應性淋巴細胞增多的原因包括注射疫苗后的短暫反應、長(cháng)期免疫刺激、甲狀腺功能亢進(jìn)等;腎上腺皮質(zhì)功能減退也會(huì )導致淋巴細胞增多,并常伴隨低血糖、電解質(zhì)異常,出現高鉀低鈉和高鈣血癥;淋巴瘤、胸腺瘤可見(jiàn)淋巴細胞異常升高,淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞異常升高的同時(shí)伴有其他細胞系的減少。
淋巴細胞減少
淋巴細胞減少最常見(jiàn)的原因是內外源性皮質(zhì)類(lèi)固醇激素增多,導致其從血液循環(huán)中轉移到淋巴組織中。在急性炎癥反應、病毒感染以及發(fā)生內毒素血癥和敗血癥時(shí),也可見(jiàn)淋巴細胞減少。免疫缺陷病毒感染、免疫抑制藥物的使用也會(huì )讓淋巴細胞生成減少。淋巴回流受阻或丟失也會(huì )讓其計數減少。
(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓形核;(B)單核細胞,特征是有腎形細胞核;(C)中性粒細胞,特征為有紫色多小葉細胞核。
(圖片來(lái)源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細胞:中性粒細胞
中性粒細胞增多
與其他哺乳動(dòng)物一樣,急性炎癥反應的特征是中性粒細胞增多并有核左移。但并不是出現中性粒細胞增多就意味著(zhù)急性炎癥反應,動(dòng)物經(jīng)歷劇烈運動(dòng)、驚嚇傷心等強烈情緒后也可出現生理性中性粒細胞增多,但不會(huì )出現核左移。
應激或皮質(zhì)類(lèi)固醇也可導致動(dòng)物出現中性粒細胞數量增加,無(wú)左移。
此外慢性粒細胞性白血病、中性粒細胞功能障礙也可使中性粒細胞數量增加,同時(shí)出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減少等異常。
正常情況下,外周血液中性粒細胞以分葉核為主,胞核常分為2~5葉,桿狀核較少。中性桿狀核粒細胞增多或(和)出現晚幼粒細胞、中幼粒細胞,甚至原始/早幼粒細胞的現象,稱(chēng)為核左移。
中性粒細胞減少
中性粒細胞減少也非常常見(jiàn),其中臨床常見(jiàn)的因素為嚴重的細菌感染,例如肺炎、敗血癥、腹膜炎等,常會(huì )伴隨核左移和中毒性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感染和腫瘤等也可造成中性粒細胞減少,同時(shí)可能會(huì )伴有紅細胞和血小板的減少。
白細胞:嗜酸性粒細胞
嗜酸性粒細胞主要聚集在皮膚、消化道和呼吸道黏膜等疏松結締組織中,它的增多常見(jiàn)于寄生蟲(chóng)感染的動(dòng)物和發(fā)生I型超敏反應的動(dòng)物。也由于其分布特點(diǎn),大多血液寄生蟲(chóng)不會(huì )引起嗜酸性粒細胞增多。此外,還有一些臨床原因可導致嗜酸性粒細胞增多,比如嗜酸性粒細胞性腸炎、嗜酸性肌炎等炎癥反應;某些能促進(jìn)嗜酸性粒細胞生成和釋放的腫瘤(淋巴瘤、鱗狀細胞癌等);腎上腺皮質(zhì)機能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞
嗜堿性粒細胞參與遲發(fā)性過(guò)敏和寄生蟲(chóng)免疫反應,因此嗜堿性粒細胞增多癥常和嗜酸性粒細胞增多癥同時(shí)發(fā)生。此外還可見(jiàn)于高脂血癥、嗜堿性粒細胞性白血病和骨髓增生性疾病。
白細胞:?jiǎn)魏思毎?/strong>
單核細胞等主要功能是吞噬作用、調節炎癥反應、參與抗原提呈、參與鐵的調節。因此當機體出現急性或慢性炎癥、組織壞死時(shí),都會(huì )導致單核細胞增多。中性粒細胞減少時(shí)也會(huì )出現單核細胞代償性增加。其他不常見(jiàn)的原因還包括應激或類(lèi)固醇、單核細胞白血病等。嚙齒類(lèi)動(dòng)物中,多達25%的F344大鼠會(huì )發(fā)生單核細胞性白血病。發(fā)病動(dòng)物外周血中,可見(jiàn)非典型性單核細胞,白細胞計數極度增高和溶血性貧血。
血小板
血小板為骨髓巨核細胞胞漿裂解脫落的小塊胞質(zhì),其主要作用是凝血和止血,修補破損血管。嚙齒類(lèi)動(dòng)物的血小板數量和凝血過(guò)程與其他哺乳動(dòng)物相似。在小鼠、大鼠或豚鼠中,未觀(guān)察到血小板計數的性別或品系差異。大鼠的血小板會(huì )聚集,計數往往不可靠。
血小板減少
血小板減少癥發(fā)生時(shí),動(dòng)物可出現瘀斑、瘀點(diǎn)、黏膜出血、止血困難等。但血液分析儀判讀為血小板減少時(shí),應做血涂片確認是否發(fā)生凝集,因為血小板做血液采集、運輸、儲存過(guò)程中會(huì )活化并凝集進(jìn)而影響機器讀取數據。通過(guò)無(wú)創(chuàng )性靜脈穿刺采血、使用檸檬酸鹽抗凝劑、減少采樣后儲存時(shí)間、避免低溫等措施可以減少這種影響。
通常血小板減少是一過(guò)性的,跟多種系統性疾病都有關(guān)聯(lián),隨著(zhù)疾病的康復,血小板計數也會(huì )恢復正常。持續性的或進(jìn)行性的血小板減少癥表明血小板生成或消耗持續失衡。例如血小板減少伴隨白細胞減少和(或)貧血通常提示骨髓疾病引起的造血功能障礙;免疫介導的破壞等。
血小板增多
血小板計數增多可能由原發(fā)性血小板增多癥、骨髓增殖性疾病和繼發(fā)性血小板增多癥引起。